Caracterización de la cepa P. chrysogenum L2, obtenida de la interrupción del gen lys3 que participa en la ruta biosintética de lisina.

Velasco T., Naranjo L. , Casqueiro J., Ullán R.V., Lamas M., Teves F. y Martin J.F.

Inbiotec. Av. Real 1. 24006, León, España. Email: tanveco@yahoo.es

Penicillium chrysogenum utiliza la ruta del ácido L-a-aminoadípico para formar lisina. El ác. L-a-aminoadípico se necesita en grandes cantidades para la biosíntesis de penicilina y es obtenido a partir de la ruta biosintética de lisina.

En este trabajo se ha caracterizado el mutante de P. chrysogenum L2, un auxótrofo de lisina deficiente en la actividad homoaconitasa. El gen lys3, que complementa dicha mutación, fue clonado por transformación utilizando una librería genómica de P. chrysogenum construida en un plásmido de replicación autónoma. El análisis de la mutación presente, reveló la existencia de una mutación puntual de una G¹⁵³² por una A¹⁵³². Esta mutación está en una región altamente conservada adyacente a dos de los tres residuos de cisteína que actúan como ligandos para unir la agrupación hierro- azufre que requiere la actividad de la homoaconitasa.

La cepa L2 mostró niveles de transcripción significativamente más altos que la cepa control, para los genes lys1 y lys2, estos genes codifican respectivamente la homocitrato sintasa y la a-aminoadipato reductasa, enzimas implicadas en la biosíntesis de lisina.

El mecanismo exacto de acción de la proteína Lys 3 mutada es aún desconocido. Parece ser que la proteína Lys3 podría tener una actividad bifuncional, de tal modo que la forma apo, de la misma, funcione como una proteína reguladora que controla la expresión de los otros genes de la ruta biosintética de lisina en P. chrysogenum.