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Servicio Bacteriología. C.N.M. Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda. Madrid. svaldezate@isciii.es
La falta de polimorfismo genético en Brucella spp., patógeno responsable de una de las principales zoonosis existente, limita las técnicas de tipificación disponibles para la caracterización de las cepas causantes de brotes por exposición ocupacional o por ingestión de alimentos. La aparición variable de repeticiones múltiples en tandem (VNTR) en Brucella spp. (Bricker et al., BMC Microbiology 2003), ha sido aplicada en este estudio como técnica de tipificación en cepas humanas de Brucella melitensis responsables de casos esporádicos y de brotes en España. Se procedió a la amplificación y secuenciación de los VNTR presentes en 8 loci localizados en los dos cromosomas, en dos grupos de cepas clínicashumanas de B.melitensis: i) un grupo sin relación epidemiológica (n=40 cepas), aisladas en 18 provincias durante un período de 6 años y ii) un grupo relacionado (n=19), procedente de la misma área geográfica durante un período de 3 años. Los alelos para cada locus fueron codificados en función del número de repeticiones de 8-9 bp detectadas. Para cada locus (50 - 200 bp),el número y rango de alelos identificados en el grupo no relacionado y en el grupo con relación geográfica, fueron, respectivamente: lc1 (10, 2→12;9, 3→12), lc2 (5, 2→6; 5, 2→6), lc3 (1; 1), lc4 (11, 1→14; 9, 1→17), lc5 (12, 2→6; 8, 4→13), lc6 (6, 1→6; 4, 1→6), lc7 (12, 3→15; 9, 3→12), lc8 (7, 2→13; 5, 2→6). En el grupo relacionado, se identificaron 2, 3, 2, y 2 cepas con idéntico perfil de VNTRs para todos los locus. La tipificación molecular desarrollada medianteel estudiode los VNTRs permite la caracterización decepas humanas de B. melitensis responsables de casos esporádicos y de brotes. La aplicación de la técnica “HOOF-Prints” (Hipervariable Octameric Oligonucleotide Finger-Prints) supone un avance en el estudio de la epidemiología de la brucelosis en nuestro país.